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高级切片技术:如何截面困难的组织

切割树的伐木工人的图象代表组织切片提示

这是你的经历:你精心收获,修复并嵌入你的组织,只有让你的组织碎片,皱纹或否则看起来很可怕吗?好吧,在你扔掉房间的马塔时(如果你能在第一个房间播放!),即使你是围绕困难的组织,也可以阅读我们的组织切片提示。

用于完美段的10个组织切片提示

一些组织比其他组织更难以分开。硬组织(如骨骼)和海绵状组织(如肝脏或心脏)在切片时存在特殊的挑战。此外,少于理想的固定和嵌入技术可以使截取困难。但是,有一个遗嘱的地方,有一种方法。以下是我们的前10名组织切片提示,以帮助您无论您分发什么。

1.正确修复

您的组织部分质量和完整性只与您的固定技术一样好。为此,始终使用新鲜固定试剂并优化您的固定时间。修复太长,你的样品可能变得脆弱和易碎。相反,过度固定会使你的组织变成糊状!有关适当的固定技术的更多信息,请阅读我们的组织固定101制品

*如何修复固定纸巾:在固定下易于现货,您会注意到您的组织从嵌入蜡块缩小。如果您发现隐藏性底层是您的问题,则可以在再次尝试切片之前,将脱尾状清单,重新修复并重新嵌入组织样本。

2.滋润你的样本

如果您的样本难以部分,因为组织本身很难(思考:结缔组织)或易碎(思考:意外过固定的组织),您可以通过润湿组织来更容易地切断。为此,请使用浸泡在去离子水中的干净棉刷,轻轻润湿在切片机叶片的通过之间嵌入式组织的暴露表面。显然,这使得切片有点繁琐(阅读:慢),但结果非常值得。或者,代替水,您可以使用弱洗涤剂或织物柔软剂溶液来滋润它们在部分之间的样品。

3.冷却你的街区

通过在切割之前冷却蜡块可以大大提高您的切片成功。冷蜡更加难以获得更薄和更高质量的部分。为了适当地冷却您的块,将它们放在一块铝箔上,在分切之前至少五分钟。

*警告:不要将蜡块放在冰箱里冷却!这可能导致破裂,这可以使您的样品更易碎。

4.用新的刀片

刀片便宜,比你的组织样品或你的时间便宜得多。确保定期改变您的切片机刀片。沉闷的刀片是穷人的愚蠢原因。此外,当刀片购物时,这不是讨价还价狩猎的时间,投资高质量的切片机刀片。

*警告:切勿使用以前用于粗略修剪的刀片的一部分,以创建要保留的部分。

5.用厚度玩

标准截面的厚度约为8μm,但不要犹豫,尝试厚度范围,从4到12μm。许多因素会影响切片组织的实际厚度,当您的切片机设置为略微较厚或比标准较薄时,您可能会发现您的组织削减最佳。例如,您的前几个部分的实际厚度可能比您的冷却块的凉爽导致的显微型表达厚度。

此外,您的旋转速度和刀片状况可能会影响部分的实际厚度。所以不要在Mictotome的表盘上过于修理,而是通过实验找到适合您的切片厚度。然后始终尝试在实验期间使用相同的计算机和设置。

6.漂浮你的样品

收获丝带的切片纸巾后,将丝带(闪亮的一侧下来)漂浮在清洁的去离子水浴中。为了获得最佳效果,这种水浴应设定为5-9O.c低于蜡的熔点。漂浮在水上的样品有助于去除皱纹并允许易于分拣。在短暂浮动后,将分拣部分放在带电显微镜上并将样品干燥到位。干燥最好在37℃下进行过夜。

*警告:不要超过所需的组织切片以除去它们的皱纹,可能会影响形态。

7.完善你的节奏

一般来说,慢,均匀的切口是最好的。不要停止并通过一节开始剪切。如果您是新的分布,建议您在尝试削减有价值的组织之前花一些时间在练习块上开发开发节奏。

8.使用脱钙剂

对于含有钙的硬样,您可以将暴露的嵌入式组织的表面浸泡在癸化化剂中。此操作可以允许您在需要重新申请之前进行几个部分。

*警告:在将它们安装在MicroOrme之前,请务必妥善冲洗蜡块,因为脱冰剂可能会损坏微量机油的刀片支架的压力板。

9.删除碎片

碎片通常可以在蜡块的上边缘上收集。这种堆积可以使获得粘性蜡带困难。因此,请务必定期用油漆刷或类似工具清除碎片。

10.使用磁带传输系统

磁带传输系统当您的组织非常易碎时,可以允许您删除好的部分,例如当固定或处理有故障时。在磁带传输系统中,将特殊胶带应用于嵌入式组织的暴露表面,并制作一个部分;然后将胶带,组织向下仔细放置到带电显微镜上,并在浸入溶剂中的载玻片之前用UV光固化带。

在此之后,可以将磁带移除,留下幻灯片上的(希望)的完美组织部分。然后,您必须为每个部分重复此过程。显然,这些磁带传输系统很慢,但它们可能是您最好的(和最后的!)希望切断真正脆性样本。

祝你好运和快乐的切片!

您是否发现这些组织切片提示有助于您的困难样品?或者您拥有自己的一些组织切片秘诀吗?留下评论!

最初发布于2013年12月17日。审查和更新了3月2021日。

切割树的伐木工人的图象代表组织切片提示

1条评论

  1. 现金 2017年10月20日在上午5:35

    我正在尝试截面(皱索)我的实验样品即。胚胎组织(13.5 dpc的胚胎睾丸),即使在使用组织tek之后,我也没有得到良好的部分。需要浸没帮助,并且可以作为协议或一些术语支持

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