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PCR,QPCR和QRT-PCR

什么是pcr?- 初学者指南

将PCR管插入热循环仪中的手套,以表示如何开始使用PCR的问题

如果您需要复制,序列或量化DNA,则需要了解PCR。但是pcr是什么?阅读我们的PCR过程指南,并发现提示帮助您避免最常见的PCR陷阱。

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如何防止菌落PCR中的错误结果

如何防止菌落PCR中的错误结果

如何防止菌落PCR菌落PCR在菌落PCR菌落PCR节省时间并通过消除对质粒纯化的需要降低成本。然而,混淆结果比比皆是 - 但只有你没有预料到他们。本文概述了虚假结果的主要肇事者以及如何防止它们。有更多一般概述...

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多重连接依赖性探针扩增(MLPA)

DNA序列MLPA

多重连接依赖性探针扩增(MLPA)是MRC-Holland在2002年开始的分子技术。在NutShell中,MLPA是一种敏感的技术,允许快速有效地定量核酸序列。它在全球许多实验室中进行,可以应用于检测副本编号(如删除或重复)的...

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站点导向诱变提示和技巧

站点导向诱变提示和技巧

有几种不同的方法可以接近地点定向诱变。在这里,我将为您提供逆资PCR的快速介绍以及为什么它是有用的,以及使用修改后的引物进行SDM的完整协议!

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免疫pcr:一种高灵敏度的免疫检测方法

免疫聚合酶链反应,免疫检测,PCR, ELISA,检测方法

研究人员依赖于免疫缩进技术,例如蛋白质印迹,流式细胞术和酶联免疫吸附测定(ELISA),但是免疫PCR是相对较新的方法。通过将ELISA与聚合酶链反应(PCR)合并,免疫PCR提供极高的测定敏感性。ELISA A ELISA是一种分子的测定。

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重要的差异:检测微卫星多态性

微卫星

如果您在遗传学中有任何培训,则在您的教育过程中,您在您的教育过程中遇到那些称为微卫星的搞笑小序列。这些是重复的串联主题1-6核苷酸长,散落在我们的基因组上。这些曾经被称为“垃圾DNA”,因为研究人员认为重复没有任何目的。如今,…

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引物验证是行不通的-现在怎么办?

引物验证是行不通的-现在怎么办?

感兴趣基因的引物终于到了邮件中,您可以弄清楚您最喜欢的基因表达水平是否在那些珍贵的组织样本中升高。在您继续之前只有一个小的一步。底漆验证。这是您运行PCR或QPCR的标准程序......

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你应该做的QRT-RTPCR控制,但可能不是

qrt-rtpcr.

现在,每个男人、女人和狗都在做实时逆转录酶定量PCR (qRT-rtPCR)。这是测量你最喜欢的转录本表达水平的好方法。定量PCR的一大优势(就像瑞士国旗一样!)是它的高灵敏度。原则上,它可以检测和量化一个分子的…

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用pcr方法定量等位基因特异性基因的表达

可以针对各种生物学原因发生等位基因特异性表达,例如由突变引起的基因印迹或差异转录,或单核苷酸多态性(SNP)或表观遗传改变。传统的终点RT-PCR或基于QRT-PCR的方法仅检测来自给定基因的mRNA表达的总体水平,而不是源自个体的mRNA转录物。如果您的项目需要更多...

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决策,决策:如何为您的实验选择最佳QPCR探针

决策,决策:如何为您的实验选择最佳QPCR探针

在我们进一步研究之前,我们需要弄清楚一些事情:RT-PCR、qPCR和RT-qPCR。太太太混乱,amirite ? ?它们都指特定的分子生物学检测,但不幸的是,它们的名称互换使用,这可能会让任何人都非常困惑。言归正传:RT-PCR是逆转录酶PCR的缩写,…

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如何在困难的PCR中生存

如何在困难的PCR中生存

我相信你们很多人都在那里。一切顺利,你的项目似乎完美地锻炼。然后有这个PCR。出于某种原因,它只是不起作用。它是您记录的黑点。即使我有一个科学的心态,我必须是......

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用正确的PCR仪器放大PCR成功!

用正确的PCR仪器放大PCR成功!

如今,几乎每个生物学实验室都有一个PCR仪器 - 从便携式,电池供电的机器到“PCR-BY-WATER BATHS”,DO-IT-SWEAPCCR,或熟悉的供应商包,包括具有实时量化或液滴的供应商包数字能力,DNA扩增取决于鲁棒的热循环仪。如果您要升级,请添加到甚至更换实验室的当前PCR ...

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微软Excel可以帮助你设置多孔板

当你是qPCR或qRT-PCR的新手时,很常见的做法是把所有的东西都写在你的实验笔记本上,然后单调乏味地标出试剂或样品。人们通常会从一个主混合物开始,将其添加到多个样本中,如(Mg2+, dNTPs, 10X PCR缓冲液,添加剂,…

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RT-qPCR中插入染料或荧光探针?

RT-qPCR中插入染料或荧光探针?

实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)的独特特点是它将目标基因的扩增与荧光信号以可量化的方式联系在一起。目前,在设计RT-qPCR实验时,有许多荧光工具包/方法需要考虑。然而,可选择的两大类是荧光插层染料和…

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oligo纯化方法:如何,为什么和什么?

oligo纯化

谁在我们中间没有需要实验中的寡核苷酸?它是许多程序和技术中的基石。取决于目标,可以很难设计正确的Oligo为您的实验。寡核苷酸必须具有正确的长度;适量的C-G,T-A;他们无法形成次要......

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抑制剂困扰你的PCR

它经常发生在PCR的情况下你做正确的一切。您有完全孤立的模板DNA,使用无菌管和尖端,用过清洁试剂,并对PCR神的快速祷告。仍然,未知的东西会使结果弥补您的结果。这种在工作中的未知是PCR抑制剂。在你责怪之前......

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PCR陷阱:魔鬼是细节

PCR陷阱

PCR实际上是我作为本科生学会的第一个实验室技术之一。尽管有时被称为漂亮的基本实验室技能,但PCR并不总是按预期工作。这种“Fickle”成功是由于PCR工作流程中的细节或隐藏危险,可能导致您看似简单的实验失败。这…

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qPCR和RNAseq:股之战!

qPCR和RNAseq:股之战!

在本网络研讨会中,您将了解如何与新技术相结合使用的QPCR,如RNASEQ,以及如何帮助您在您的研究中。本网络研讨会中涵盖的主要方面包括:当您应该单独选择RNA-SEQ过度QPCR时,用于表达分析为什么以及如何验证RNASEQ ...

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划分并征服:如何设置第一个液滴数码PCR实验

液滴数码PCR.

液滴数码PCR?这很简单。因为我们来到这里引导你。我们最近向您介绍了数字PCR技术的原则以及它与QPCR的不同之处。在坚果壳中,数字PCR是一种终点PCR技术,其将单个PCR分成大量分区,然后执行PCR ...

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如何选择正确的逆转录方法

定量反转录PCR (Quantitative Reverse transcription PCR, RT-qPCR)是实验室常用的检测和定量样本中RNA表达的方法。检测的第一步是通过逆转录(RT)将不稳定RNA转化为其互补DNA (cDNA)对应物。事实上,RT是各种分子生物学的第一步……

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小粒子(东西)很重要!-引入纳米粒子PCR

纳米粒子PCR.

有许多不同的方法和协议,让PCR更有效地运行。我最近遇到了一种称为“纳米粒子”PCR的有趣的PCR方法。这种方法似乎吸引了很多关注,因为它通过几个数量级增强了PCR。更有趣的是,虽然在...中报告了增强效果

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Masstag PCR介绍

Masstag PCR介绍

执行PCR的新方法一直出现。这对技术进步的速度表示说话,并反映了持续需要跟上快速移动的研究。我们都知道PCR的主要目的是扩增基于序列特异性引物的核酸拉伸。如今,存在广泛的PCR技术,......

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逆转录:最常见的缺陷!

逆转录:最常见的缺陷!

好质量的起始材料是逆转录之王!在任何实验中获得可靠的结果都需要充分的准备。我们通常认为逆转录是理所当然的,我们并不总是认为qPCR可能因为这一步的问题而表现不佳。因为通常是逆转录反应本身引起混乱…

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更快的PCR优化

更快的PCR优化

因此,您已经设计了PCR引物,以放大您的兴趣顺序,并且您已准备就绪。但除非您有永无止境的模板,聚合酶和具有梯度函数的热循环速率,否则更不用说足够的时间和耐心,

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多重PCR技术:它是关于什么的?

多重PCR技术:它是关于什么的?

Join Dr. Karen O’Hanlon Cohrt for a practical tour of multiplex PCR technology, where you will learn the following and much more: Principle behind multiplex PCR technology Popular applications of this technology How to set up this reaction Advantages and disadvantages Multiplex PCR Can Benefit Your Research Dr O’Hanlon Cohrt will discuss the history of…

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QPCR标准曲线

QPCR标准曲线

乍一看,实时PCR看起来像一个非常简单的技术 - 非常简单。此外,当它进行了优化时,实时PCR导致有趣的结果。然而,为了获得反映现实的一致和准确的结果,良好的控制对于SYBR QPCR至关重要。其中一个控件是QPCR标准曲线,用于检查引物的效率。有效的引物......

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DNA像职业一样洗牌

DNA像职业一样洗牌

DNA Shuffling以非常有创意的方式使用PCR技术。它允许您修改蛋白质以制作您想要的新蛋白质。您可以在自己的实验室长凳上在微量化管中演化蛋白质。那不是太棒了吗?DNA Shuffling也是针对定向分子演进的一种非常强大的技术。W. Dewer首次使用......

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从革命到进化:茎环实时PCR

茎环结构的实时聚合酶链反应

1985年,Kary Mullis发明了聚合酶链反应(polymerase chain reaction, PCR),在分子生物学技术上掀起了一场革命。但它并没有就此止步。多年来,PCR有了很大的发展。今天,我们可以实时克隆微rna (miRNAs) !由于miRNA大小(约18-21个核苷酸长)和不同的表达水平,…

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如何为你的实验选择正确的吸管提示

如何为你的实验选择正确的吸管提示

如果您选择错误的提示,即使是最佳校准的移液管的精度和准确性也可以擦除。根据您所做的实验,错误的秘诀也可以使您的移液器是污染的源,导致储存珍贵的样品或试剂 - 甚至导致你的身体......

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实时PCR消化

实时PCR消化

在本发明30多年来,聚合酶链反应(PCR)已成为分子生物学家的面包和黄油技术。其不可或缺性的秘诀在于其简单和多功能性。已经开发了许多技术的变体;其中一个实时PCR,已成为定量选择的方法......

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QPCR数据的相对量化方法。是的,有多个。

相对量化

随着您所有人所知道的,用于计算来自QPCR数据的相对基因表达的方法包括:a)双Δct(ΔΔct)和b)另一种方法。您可能已经超出了ΔΔCT方法的机会,但您应该在面对不同放大效率的底漆集中制作。两种方法都需要......

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解码癌症:研究细胞异质性的实用建议

解码癌症:研究细胞异质性的实用建议

在本网络研讨会中,您将了解基因分型细胞的过程 - 特别是肿瘤细胞以及用于分析所得数据的实际建议。我们将涵盖的要点是:用于样品收集的实用建议和方法,并为基因分型实验进行准备,概述您的基因分型结果的可用数据分析方法......

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必要的PCR故障排除清单

必要的PCR故障排除清单

常规PCR?让我们说实话,没有这样的东西。即使具有最简单的PCR反应,事情可能会出错,所以你需要有一个很好的核对清单,用于PCR故障排除并纠正问题。今天我已经集体了解所有方法,我可以想到与标准PCR反应接近问题。......

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在敏感QPCR方面,斯佩鲁的萌芽

敏感QPCR.

第一次有驾驶全新技术。然后,跳过试图获得建立的实验室技术的篮球。与后者相比,前者预计会充满困难。然而,旧实验室技术不再工作了,这是一个全新的水平令人沮丧。...

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2015年工作人员选择:PCR与实时PCR

PCR.

为了总结2015年,我们将重点列出这一年我们最喜欢的文章。这些文章是我们Bitesize Bio的编辑人员精心挑选的。bob体育是赌钱的吗所以,坐下来喝杯咖啡(或其他饮料),享受这些2015年的精彩文章吧。首先,我们有PCR和Real-time PCR的分类。珍…

PCR. 阅读更多
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